RIPA細(xì)胞裂解液
產(chǎn)品詳情:
RIPA裂解液是較可靠的緩沖液之一,其主要成分含1% NP-40, 0.5% Sodium deoxycholate, 0.1% SDS,該緩沖液能夠從細(xì)胞質(zhì),膜和核蛋白質(zhì)中提取蛋白質(zhì),并且與許 多應(yīng)用相容,包括蛋白質(zhì)分析,和蛋白質(zhì)純化。RIPA緩沖液不含蛋白酶或磷酸酶,如果需要,可將酶添加到試劑中以防止蛋白質(zhì)水解并維持蛋白質(zhì) 的磷酸化狀態(tài)。一些蛋白激酶和其他酶可能對(duì)RIPA緩沖液的組分敏感,導(dǎo)致其活性降低。 在這種情況下,準(zhǔn)備不含脫氧膽酸鈉和SDS的RIPA緩沖液。
注意事項(xiàng):
1.抽提蛋白的所有步驟都需在冰上或4℃進(jìn)行。
2.裂解得到的蛋白樣品,含有較高濃度的去垢劑,不建議用Bradford 法測(cè)定蛋白濃度,可以選用BCA蛋白定量試劑盒測(cè)定蛋白濃度。
3.裂解產(chǎn)物中經(jīng)常會(huì)出現(xiàn)一小團(tuán)透明膠狀物,屬正?,F(xiàn)象。該透明膠狀物為含有基因組DNA等的復(fù)合物。在不檢測(cè)和基因組DNA結(jié)合特別緊密的蛋白的情況下,可以直接離心取上清用于后續(xù)實(shí)驗(yàn);如果需要檢測(cè)和基因組結(jié)合特別緊密的蛋白,則可以通過(guò)超聲處理打碎打散該透明膠狀物,隨后離心取上清用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。如果檢測(cè)一些常見(jiàn)的轉(zhuǎn)錄因子,例如NFKB、p53等時(shí),通常不必進(jìn)行超聲處理,就可以檢測(cè)到這些轉(zhuǎn)錄因子。 細(xì)胞增殖涉及的內(nèi)容有哪些?重慶檢測(cè)細(xì)胞增殖教學(xué)視頻
上海儒安生物科技有限公司轉(zhuǎn)膜液
產(chǎn)品簡(jiǎn)介:
我們生產(chǎn)的Western轉(zhuǎn)膜液(Western Transfer Buffer)可以用于Western時(shí)濕法電轉(zhuǎn)膜,是一種快速效率高的特有配方轉(zhuǎn)膜液,效果較好。
轉(zhuǎn)印快速——室溫轉(zhuǎn)膜,20-30 分鐘內(nèi)將蛋白轉(zhuǎn)移到印跡膜上。
轉(zhuǎn)印效率高——產(chǎn)生熱量非常小,減少蛋白損失。
配置靈活——配置1*轉(zhuǎn)膜液時(shí)加入無(wú)水甲醇、無(wú)水乙醇均可,效果沒(méi)有明顯差異,兼容性好。
使用方法:
1* 快速轉(zhuǎn)膜液的配制(1000 ml):
取100ml 此產(chǎn)品+800 ml 去離子水+100ml甲醇。
電轉(zhuǎn)儀的設(shè)置:
一個(gè)轉(zhuǎn)印槽:電壓:110V, 電流:400mA;
二個(gè)轉(zhuǎn)印槽:電壓:140V,電流:700mA;
100kD 以下蛋白,膠濃度<10%的,轉(zhuǎn)印時(shí)間20分鐘即可轉(zhuǎn)印完畢。
100kD 以上蛋白,膠濃度≥10%的,轉(zhuǎn)印時(shí)間30分鐘即可轉(zhuǎn)印完畢。上海pcr檢測(cè)細(xì)胞增殖染色細(xì)胞增殖是生活細(xì)胞的重要生理功能之一。
抗體稀釋參考一抗稀釋范圍為1mg/mL原液1:1000-1:5000或0.2-1.0µg/mL,二抗稀釋范圍為1mg/mL原液1:2000-1:10000或10-50ng/mL  注意事項(xiàng)  1.使用該產(chǎn)品比使用沉淀比色HRP底物檢測(cè)所需的抗體濃度低。為優(yōu)化抗體濃度,請(qǐng)進(jìn)行一次系統(tǒng)的點(diǎn)印跡分析;  2.工作液在室溫下8小時(shí)內(nèi)可以保持穩(wěn)定,但是應(yīng)該避免暴露在陽(yáng)光下或任何其他強(qiáng)光環(huán)境,然而短期實(shí)驗(yàn)室照明強(qiáng)度不會(huì)破壞工作液的穩(wěn)定性;  3.封閉試劑有可能與抗體產(chǎn)生交叉反應(yīng),導(dǎo)致出現(xiàn)非特異性信號(hào)。封閉緩沖液同時(shí)也會(huì)影響系統(tǒng)的靈敏性,當(dāng)從一種底物轉(zhuǎn)換為另一種底物時(shí),有時(shí)會(huì)出現(xiàn)信號(hào)衰減或背景增加的現(xiàn)象,原因可能是封閉緩沖液不適合新的檢測(cè)系統(tǒng);  4.使用親和素/生物素檢測(cè)系統(tǒng)時(shí),避免使用牛奶作為封閉試劑,因?yàn)榕D讨泻胁欢康膬?nèi)源性生物素,會(huì)導(dǎo)致高背景信號(hào);  5.保證洗滌緩沖液、封閉緩沖液、抗體溶液和底物工作液的使用體積,以確保在整個(gè)實(shí)驗(yàn)過(guò)程中印跡膜完全被液體覆蓋,避免膜變干。增大封閉緩沖液及洗滌緩沖液的使用量可以降低非特異性的信號(hào);
轉(zhuǎn)膜液
產(chǎn)品簡(jiǎn)介:
我們生產(chǎn)的Western轉(zhuǎn)膜液(Western Transfer Buffer)可以用于Western時(shí)濕法電轉(zhuǎn)膜,是一種快速效率高的特有配方轉(zhuǎn)膜液,效果較好。
1、轉(zhuǎn)印快速——室溫轉(zhuǎn)膜,20-30 分鐘內(nèi)將蛋白轉(zhuǎn)移到印跡膜上。
2、轉(zhuǎn)印效率高——產(chǎn)生熱量非常小,減少蛋白損失。
配置靈活——配置1*轉(zhuǎn)膜液時(shí)加入無(wú)水甲醇、無(wú)水乙醇均可,效果沒(méi)有明顯差異,兼容性好。
使用方法:
1* 快速轉(zhuǎn)膜液的配制(1000 ml):
取100ml 此產(chǎn)品+800 ml 去離子水+100ml甲醇。
電轉(zhuǎn)儀的設(shè)置:
一個(gè)轉(zhuǎn)印槽:電壓:110V, 電流:400mA;
二個(gè)轉(zhuǎn)印槽:電壓:140V,電流:700mA;
100kD 以下蛋白,膠濃度<10%的,轉(zhuǎn)印時(shí)間20分鐘即可轉(zhuǎn)印完畢。
100kD 以上蛋白,膠濃度≥10%的,轉(zhuǎn)印時(shí)間30分鐘即可轉(zhuǎn)印完畢。 細(xì)胞增殖是生物體生長(zhǎng)、發(fā)育、繁殖和遺傳的基礎(chǔ)。
T細(xì)胞增殖試驗(yàn)類型(1)形態(tài)法:其原則是將外周血液或分離的單個(gè)細(xì)胞與適量的植物血凝素(PHA)混合,置37℃培養(yǎng)72h,取培養(yǎng)細(xì)胞作涂片染色鏡檢。據(jù)細(xì)胞的大小、核與胞漿的比例、胞漿的染色性和核結(jié)構(gòu)以及有無(wú)核仁等特征,分別計(jì)數(shù)淋巴母細(xì)胞、過(guò)渡性母細(xì)胞和核有絲分裂相以及成熟的小淋巴細(xì)胞,以前三者為轉(zhuǎn)化細(xì)胞,每份標(biāo)本計(jì)數(shù)200個(gè)細(xì)胞,計(jì)算轉(zhuǎn)化率。  (2)核素法:絕大多數(shù)外周血T細(xì)胞通產(chǎn)處于細(xì)胞周期的G0期,受特異性抗原或促有絲分裂原后,從G0期進(jìn)入G1期,開(kāi)始合成蛋白質(zhì)、RNA和DNA前體物質(zhì)等,為DNA復(fù)制準(zhǔn)備物質(zhì)基礎(chǔ),然后進(jìn)入S期,細(xì)胞合成DNA量倍增,此時(shí)若在培養(yǎng)液中加入3H標(biāo)記的TdR,后者摻入新合成的DNA中,據(jù)摻入的多少推測(cè)細(xì)胞增殖程度。CCK8的實(shí)驗(yàn)步驟、實(shí)驗(yàn)分組及檢測(cè)方法。西安醇促進(jìn)b細(xì)胞增殖試劑盒
細(xì)胞增殖的研發(fā)途徑。重慶檢測(cè)細(xì)胞增殖教學(xué)視頻
產(chǎn)品簡(jiǎn)介:
我們生產(chǎn)的Western轉(zhuǎn)膜液(Western Transfer Buffer)可以用于Western時(shí)濕法電轉(zhuǎn)膜,是一種快速效率高的特有配方轉(zhuǎn)膜液,效果較好。
1、轉(zhuǎn)印快速——室溫轉(zhuǎn)膜,20-30 分鐘內(nèi)將蛋白轉(zhuǎn)移到印跡膜上。
2、轉(zhuǎn)印效率高——產(chǎn)生熱量非常小,減少蛋白損失。轉(zhuǎn)印快速——室溫轉(zhuǎn)膜,
配置靈活——配置1*轉(zhuǎn)膜液時(shí)加入無(wú)水甲醇、無(wú)水乙醇均可,效果沒(méi)有明顯差異,兼容性好。
使用方法:
1* 快速轉(zhuǎn)膜液的配制(1000 ml):
取100ml 此產(chǎn)品+800 ml 去離子水+100ml甲醇。
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上海儒安生物科技有限公司專注技術(shù)創(chuàng)新和產(chǎn)品研發(fā),發(fā)展規(guī)模團(tuán)隊(duì)不斷壯大。公司目前擁有較多的高技術(shù)人才,以不斷增強(qiáng)企業(yè)重點(diǎn)競(jìng)爭(zhēng)力,加快企業(yè)技術(shù)創(chuàng)新,實(shí)現(xiàn)穩(wěn)健生產(chǎn)經(jīng)營(yíng)。公司業(yè)務(wù)范圍主要包括:細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑,ecl發(fā)光液,cck8細(xì)胞增殖,內(nèi)參抗體等。公司奉行顧客至上、質(zhì)量為本的經(jīng)營(yíng)宗旨,深受客戶好評(píng)。公司深耕細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑,ecl發(fā)光液,cck8細(xì)胞增殖,內(nèi)參抗體,正積蓄著更大的能量,向更廣闊的空間、更寬泛的領(lǐng)域拓展。