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細(xì)胞外基質(zhì)的主要類型及功能：細(xì)胞外基質(zhì)多細(xì)胞生物不光光由細(xì)胞組成，還包括分布于細(xì)胞外空間，由細(xì)胞分泌的蛋白質(zhì)和多糖所構(gòu)成的網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)————細(xì)胞外基質(zhì)（extracellularmatrik，ECM）。細(xì)胞外基質(zhì)在結(jié)締組織中較為豐富，占據(jù)了結(jié)締組織的大部分空間，...

外泌體提純?cè)噭┖械奶厣c優(yōu)勢(shì)：純化和富集的完整血漿/血清，尿液和細(xì)胞培養(yǎng)基中外泌體的可用于功能研究；樣本輸入量多樣；無需耗時(shí)的超速離心，過濾或特殊注射器；無需沉淀試劑，也無需過夜培養(yǎng)；無需蛋白酶處理；適用于多種物種；外泌體被純化并且不含任何其他RNA結(jié)合蛋白；...

當(dāng)其由宿主細(xì)胞被分泌到受體細(xì)胞中時(shí)，外泌體可通過其攜帶的蛋白質(zhì)、核酸、脂類等來調(diào)節(jié)受體細(xì)胞的生物學(xué)活性。外泌體介導(dǎo)的細(xì)胞間通訊主要通過以下三種方式：一是外泌體膜蛋白可以與靶細(xì)胞膜蛋白結(jié)合，進(jìn)而啟動(dòng)靶細(xì)胞細(xì)胞內(nèi)的信號(hào)通路。二是在細(xì)胞外基質(zhì)中，外泌體膜蛋白可以被蛋...

構(gòu)成細(xì)胞外基質(zhì)的大分子：前α鏈在粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)上合成，并在形成三股螺旋之前于脯氨酸及賴氨酸殘基上進(jìn)行羥基化修飾，脯氨酸殘基的羥化反應(yīng)是在與膜結(jié)合的脯氨酰-4羥化酶及脯氨酰-3羥化酶的催化下進(jìn)行的。維生素C是這兩種酶所必需的輔助因子。維生素C缺乏導(dǎo)致膠原的羥化反應(yīng)不...

聚乙二醇（PEG）可與疏水性蛋白和脂質(zhì)分子結(jié)合共沉淀，早先應(yīng)用于從血清等樣本中收集細(xì)菌，現(xiàn)在也被用來沉淀外泌體，其原理可能與競(jìng)爭(zhēng)性結(jié)合游離水分子有關(guān)。利用PEG沉淀外泌體存在不少問題：比如純度和回收率低，雜蛋白較多（假陽(yáng)性），顆粒大小不均一，產(chǎn)生難以去除的聚合...

外泌體的提取主要包括以下幾種方式。一是超速離心法，這是目前外泌體提取較常用的方法。此種方法得到的外泌體量多，但是純度不足，電鏡鑒定時(shí)發(fā)現(xiàn)外泌體聚集成塊，由于微泡和外泌體沒有非常統(tǒng)一的鑒定標(biāo)準(zhǔn)，也有一些研究認(rèn)為此種方法得到的是微泡不是外泌體。二是過濾離心，這種操...

構(gòu)成細(xì)胞外基質(zhì)的大分子：Ⅰ型膠原的原纖維平行排列成較粗大的束，成為光鏡下可見的膠原纖維，抗張強(qiáng)度超過鋼筋。其三股螺旋由二條α1（Ⅰ）鏈及一條α2（Ⅰ）鏈構(gòu)成。每條α鏈約含1050個(gè)氨基酸殘基，由重復(fù)的Gly-X-Y序列構(gòu)成。X常為Pro（脯氨酸），Y常為羥脯氨...

細(xì)胞可以通過施力和測(cè)量產(chǎn)生的反作用力來感知環(huán)境的機(jī)械特性。這發(fā)揮著重要作用，因?yàn)樗兄谡{(diào)節(jié)許多重要的細(xì)胞過程，包括細(xì)胞收縮，細(xì)胞遷移，細(xì)胞增殖，分化[和細(xì)胞死亡(凋亡)。克制非肌肉肌球蛋白ⅱ阻斷了大部分這些效應(yīng)，表明它們確實(shí)與細(xì)胞外基質(zhì)的機(jī)械特性有關(guān)，這在過...

在無菌條件下提取人體體液，并用PBS緩沖液進(jìn)行稀釋，然后通過離心篩選初步去除體液中的細(xì)胞成分和細(xì)胞碎片，制成體液樣本備用；體液樣本純化：通過過濾膜對(duì)上述體液樣本進(jìn)行過濾，進(jìn)一步去除體液中的細(xì)胞殘片及其他雜質(zhì)，靜置10～15分鐘，留取沉淀物備用；外泌體提取：將上...

外泌體的形成與鑒定：首先，細(xì)胞膜內(nèi)陷形成一個(gè)杯狀結(jié)構(gòu)，包括細(xì)胞表面蛋白和與細(xì)胞外環(huán)境相關(guān)的可溶性蛋白，導(dǎo)致早期胞內(nèi)體(early-sortingendosome，ESE)的從頭形成，或者是杯狀結(jié)構(gòu)直接和已經(jīng)存在的ESEs融合；trans-高爾基體和內(nèi)質(zhì)網(wǎng)也能協(xié)...

用于外泌體提取的體液收集注意事項(xiàng)：1、選擇血清還是血漿？推薦大多數(shù)研究選擇血漿。血液凝固過程中血小板會(huì)產(chǎn)生大量外泌體，含量占血清中外泌體的50%以上，選擇血漿可避免不必要的影響。2、注意抗凝劑的選擇。肝素類抗凝劑與PCR假陰性有關(guān)，這可能是因?yàn)楦嗡嘏c引物和/或...

細(xì)胞外基質(zhì)和膠原的結(jié)構(gòu)：膠原（collgen)的結(jié)構(gòu)：在膠原纖維中，膠原的分子單位稱為原膠原，由3條多肽鏈組成3股螺旋結(jié)構(gòu)，相對(duì)分子質(zhì)量約30萬(wàn)左右，長(zhǎng)達(dá)300nm,而直徑為1.5nm。原膠原分子中每隔64~70nm即有易于染色的極性部位存在，而在膠原微纖維中...

外泌體的提取分離：1、超速離心法（差速離心）。超離法是常用的外泌體純化手段，采用低速離心、高速離心交替進(jìn)行（如圖所示），可分離到大小相近的囊泡顆粒。超離法因操作簡(jiǎn)單，獲得的囊泡數(shù)量較多而廣受歡迎，但過程比較費(fèi)時(shí)，且回收率不穩(wěn)定（可能與轉(zhuǎn)子類型有關(guān)），純度也受到...

近年來，隨著外泌體研究的不斷深入，它的應(yīng)用已經(jīng)涉及一些病癥治病領(lǐng)域、醫(yī)學(xué)基礎(chǔ)和免疫領(lǐng)域、寄生蟲領(lǐng)域；臨床研究上已涉及心血管系統(tǒng)、內(nèi)分泌代謝系統(tǒng)等。外泌體來源及內(nèi)含物。幾乎所有類型的細(xì)胞都可以分泌外泌體，同時(shí)外泌體也普遍存在于體液中，包括血液、眼淚、尿液、唾液、...

功能：由于其不同的性質(zhì)和組成，細(xì)胞外基質(zhì)可以發(fā)揮許多功能，例如提供支持、將組織相互隔離以及調(diào)節(jié)細(xì)胞間的通訊。細(xì)胞外基質(zhì)調(diào)節(jié)細(xì)胞的動(dòng)態(tài)行為。此外，它能隔離多種細(xì)胞生長(zhǎng)因子，并充當(dāng)它們的局部?jī)?chǔ)存庫(kù)。生理?xiàng)l件的變化會(huì)引發(fā)蛋白酶活性，從而導(dǎo)致這類物質(zhì)在局部釋放。這允許...

外泌體提?。?、過濾。超濾膜也可用于分離外泌體。根據(jù)外泌體的大小，從蛋白質(zhì)和其他大分子中分離外泌體。較常見的過濾膜具有0.8μm、0.45μm或0.22μm的孔徑，可用于收集大于800nm、400nm或200nm的外泌體，也有設(shè)計(jì)成微柱多孔硅纖毛結(jié)構(gòu)以分離40...

1983年，外泌體初次于綿羊網(wǎng)織紅細(xì)胞中被發(fā)現(xiàn)，1987年Johnstone將其命名為“exosome”。多種細(xì)胞在正常及病理狀態(tài)下均可分泌外泌體。其主要來源于細(xì)胞內(nèi)溶酶體微粒內(nèi)陷形成的多囊泡體，經(jīng)多囊泡體外膜與細(xì)胞膜融合后釋放到胞外基質(zhì)中。所有培養(yǎng)的細(xì)胞類型...

外泌體的生物學(xué)功能研究中需要分離完整的外泌體顆粒，而傳統(tǒng)超速離心方法步驟繁瑣、硬件要求高、操作難度大。李記生物自主開發(fā)的外泌體快速提取試劑盒，組分經(jīng)過優(yōu)化處理，適用于細(xì)胞培養(yǎng)上清液、血清、血漿、尿液及其他體液（腦脊液、腹水、羊水、乳汁以及唾液等）中的外泌體提取...

蛋白聚糖在細(xì)胞外基質(zhì)中的功能是什么：蛋白聚糖的這種性質(zhì)，使細(xì)胞表面具有較大的可塑性，從而具有抗擠壓能力，對(duì)細(xì)胞起保護(hù)作用。由于透明質(zhì)酸以可溶的形式游離存在，所以在細(xì)胞外體液和滑液(synovialfluid)中透明質(zhì)酸的濃度很高，其結(jié)果提高了體液和滑液的粘度和...

外泌體在肺病進(jìn)程中的作用：在一些病癥微環(huán)境中，一些病癥細(xì)胞來源的外泌體能夠誘導(dǎo)CD4+T分化為調(diào)節(jié)性T細(xì)胞，壓制機(jī)體的抗一些病癥免疫反應(yīng)；肺病細(xì)胞分泌的外泌體含有miR-21和miR-29a，可在免疫細(xì)胞中結(jié)合并啟動(dòng)TLR8，使TLR介導(dǎo)的NF-κB信號(hào)通路活...

這種轉(zhuǎn)化細(xì)胞接種入正常機(jī)體，常能長(zhǎng)成塊，并侵潤(rùn)正常組織，發(fā)生普遍轉(zhuǎn)移。如何理解細(xì)胞外基質(zhì)影響細(xì)胞的粘附過程：1.決定細(xì)胞的形狀體外實(shí)驗(yàn)證明,各種細(xì)胞脫離了細(xì)胞外基質(zhì)呈單個(gè)游離狀態(tài)時(shí)多呈球形.同一種細(xì)胞在不同的細(xì)胞外基質(zhì)上粘附時(shí)可表現(xiàn)出完全不同的形狀.上皮細(xì)胞粘...

細(xì)胞外基質(zhì)的作用：（一）細(xì)胞外基質(zhì)的作用：細(xì)胞外基質(zhì)不只具有連接、支持、保水、抗壓及保護(hù)等物理學(xué)作用，而且對(duì)細(xì)胞的基本生命活動(dòng)發(fā)揮很全的生物學(xué)作用。1．影響細(xì)胞的存活、生長(zhǎng)與死亡正常真核細(xì)胞，除成熟血細(xì)胞外，大多須粘附于特定的細(xì)胞外基質(zhì)上才能克制凋亡而存活，稱...

細(xì)胞外基質(zhì)成分居然能調(diào)節(jié)葡萄糖代謝過程：細(xì)胞具有不同的機(jī)制以感知和響應(yīng)外在代謝信號(hào)。例如，細(xì)胞通過mTORC1感知營(yíng)養(yǎng)素可用性并相應(yīng)地在分解代謝和合成代謝狀態(tài)之間轉(zhuǎn)換來協(xié)調(diào)全身和細(xì)胞代謝;生長(zhǎng)因子，和細(xì)胞因子可以將代謝信號(hào)傳遞給相鄰細(xì)胞和遠(yuǎn)端組織，作為更普遍的...

所有的細(xì)胞都能分泌外泌體，但是不同細(xì)胞分泌的外泌體不管在數(shù)量上還是在內(nèi)含物中都具有很大的差異性，這也決定了每種外泌體所行使的功能不一樣。外泌體普遍參與細(xì)胞間物質(zhì)運(yùn)輸與信息傳遞，調(diào)控細(xì)胞生理活動(dòng)。同時(shí)，外泌體具有抗原提呈、免疫逃逸、誘導(dǎo)正常細(xì)胞轉(zhuǎn)化、促進(jìn)一些病癥...

細(xì)胞外基質(zhì)是動(dòng)物組織的一部分,不屬于任何細(xì)胞。它決定結(jié)締組織的特性，為細(xì)胞的生存及活動(dòng)提供適宜的場(chǎng)所，并通過信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)系統(tǒng)影響細(xì)胞的形狀、代謝、功能、遷移、增殖和分化。一旦它們召集到正確的細(xì)胞，基質(zhì)便會(huì)展現(xiàn)它的另一大作用：它能依據(jù)細(xì)胞在基質(zhì)內(nèi)承受的張力，引導(dǎo)它們...

外泌體在肺病進(jìn)程中的作用：在一些病癥微環(huán)境中，一些病癥細(xì)胞來源的外泌體能夠誘導(dǎo)CD4+T分化為調(diào)節(jié)性T細(xì)胞，壓制機(jī)體的抗一些病癥免疫反應(yīng)；肺病細(xì)胞分泌的外泌體含有miR-21和miR-29a，可在免疫細(xì)胞中結(jié)合并啟動(dòng)TLR8，使TLR介導(dǎo)的NF-κB信號(hào)通路活...

細(xì)胞外基質(zhì)粘彈性影響細(xì)胞行為：研究人員長(zhǎng)期以來一直觀察到培養(yǎng)底物機(jī)械性能對(duì)細(xì)胞行為的影響的跡象，直到近些年來才逐漸被人們所接受，目前普遍被大家認(rèn)可的觀點(diǎn)是，細(xì)胞通過基于整合素的粘附力或其他細(xì)胞表面連接而與基質(zhì)結(jié)合時(shí)，會(huì)利用肌動(dòng)蛋白的收縮力施加牽引力，并且它們會(huì)...

細(xì)胞外基質(zhì)的作用：1．決定細(xì)胞的形狀：體外實(shí)驗(yàn)證明，各種細(xì)胞脫離了細(xì)胞外基質(zhì)呈單個(gè)游離狀態(tài)時(shí)多呈球形。同一種細(xì)胞在不同的細(xì)胞外基質(zhì)上粘附時(shí)可表現(xiàn)出完全不同的形狀。上皮細(xì)胞粘附于基膜上才能顯現(xiàn)出其極性。細(xì)胞外基質(zhì)決定細(xì)胞的形狀這一作用是通過其受體影響細(xì)胞骨架的組...

植物細(xì)胞的細(xì)胞壁相當(dāng)于植物體中的細(xì)胞外基質(zhì)。細(xì)胞外基質(zhì)主要由5類物質(zhì)組成，即膠原蛋白、非膠原蛋白、彈性蛋白、蛋白聚糖與氨基聚糖，其在上皮或內(nèi)皮細(xì)胞的基底部者為基底膜，而在細(xì)胞間黏附結(jié)構(gòu)者為間質(zhì)結(jié)締組織。細(xì)胞外基質(zhì)的化學(xué)組成包括3類：氨基聚糖和蛋白聚糖、膠原和彈...

蛋白聚糖在細(xì)胞外基質(zhì)中的功能是什么：蛋白聚糖或透明質(zhì)酸-蛋白聚糖復(fù)合物構(gòu)成了細(xì)胞外基質(zhì)的基質(zhì)，由于它們是高度酸性的，且?guī)ж?fù)電荷，因此能夠結(jié)合大量的陽(yáng)離子，這些陽(yáng)離子又可結(jié)合大量的水分子，這樣，蛋白聚糖形成了多孔的、吸水的膠狀物，如同包裝材料，填充在細(xì)胞外基質(zhì)中...