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細(xì)胞凍存和復(fù)蘇的原則：慢凍速融，這樣更加有利于保持細(xì)胞的活力。凍存細(xì)胞不加任何保護(hù)劑，會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)冰晶的產(chǎn)生，從而使細(xì)胞產(chǎn)生內(nèi)源性的機(jī)械損傷，引起細(xì)胞內(nèi)環(huán)境滲透壓，PH，電解質(zhì)等的改變，進(jìn)而促使細(xì)胞死亡。細(xì)胞凍存液除去蛋白酶，添加適量配置好的凍存細(xì)胞培養(yǎng)液.細(xì)...

膠原蛋白的提取方法：1.堿法提?。簤A法提取膠原蛋白常用的處理劑為石灰、氫氧化鈉、碳酸鈉等。如Holzer等[5]采用1%～1.5%石灰水浸泡的方法提取膠原蛋白。由于它容易造成肽鍵水解，因此得到的水解產(chǎn)物分子量比較低。所以，若想保留膠原的三股螺旋結(jié)構(gòu)，此法不可取...

鼠尾Ⅰ型膠原：選擇適當(dāng)?shù)墓切迯?fù)材料是治好骨缺損的中心環(huán)節(jié)。目前，臨床上常用的有人工骨移植、自體骨移植和同種異體骨移植。其中，人工骨材料多為磷酸三鈣、半水硫酸鈣等含有鈣和磷的無(wú)機(jī)礦物材料[1-2]，由于不含自體骨組織中的有機(jī)大分子Ⅰ型膠原蛋白，其臨床療效遠(yuǎn)遠(yuǎn)低于...

對(duì)于生物科研汪們來(lái)說(shuō)，大白鼠、小白鼠們簡(jiǎn)直渾身是寶，從毛發(fā)、皮膚，到心肝脾肺，甚至各種排泄物，都是我們重要的研究對(duì)象。尾巴，自然也是。所以耗子尾汁不僅存在，甚至是我們生物實(shí)驗(yàn)中必不可少的實(shí)驗(yàn)材料和實(shí)驗(yàn)對(duì)象。有不少人靠「耗子尾汁」發(fā)了CNS和頂刊。沒(méi)有「耗子尾汁...

鼠尾膠原蛋白的提取方法：1.將黏稠的膠體溶液進(jìn)行高速冷凍離心處理，收集上清液；在冰水浴中，用的3?6mol/L的NaCl溶液緩慢加入上清液中，不斷攪拌至溶液中白色的絮狀物不再析出，4°C沉淀10小時(shí)，去除上清液，絮狀溶液高速冷凍離心處理，收集沉淀2.用0.03...

外泌體（Exosome）是細(xì)胞主動(dòng)分泌的囊泡樣小體，大小均一，直徑30-200nm，密度1.10-1.18g/ml，來(lái)源普遍，幾乎所有細(xì)胞都可分泌，在血液，尿液，唾液，腦脊液，腹水，乳汁等體液中普遍分布。外泌體較早在1986年發(fā)現(xiàn)于培養(yǎng)的綿羊紅細(xì)胞上清液中。1...

細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞核RNA提取試劑盒特點(diǎn)：1.有效分離和提取細(xì)胞質(zhì)RNA，與細(xì)胞核RNA。2.方便快捷的離心柱操作方式。3.提取的RNA，品質(zhì)高，產(chǎn)量多。4.試劑盒不含苯酚，可提取所有RNA（含MicroRNA）。5.純化的RNA可用于任何應(yīng)用，包括RT-PCR，q...

膠原蛋白是脊椎動(dòng)物和無(wú)脊椎動(dòng)物支持結(jié)構(gòu)的主要組成。在人的身體中這是皮膚、筋、軟骨、骨骼及結(jié)締組織的較主要的蛋白質(zhì)。膠原蛋白占人體蛋白質(zhì)總量的三分之一，不論來(lái)源于哪一種動(dòng)物或哪一種組織的膠原都有許多共同特性。氨基酸組成中約有三分之一為甘氨酸，有脯氨酸和羥脯氨酸。...

細(xì)胞凍存液是如何保護(hù)細(xì)胞的：細(xì)胞這一微小的生命體和地球的其它生命相似，機(jī)體的主要成份是由液態(tài)的H2O組成，但是其結(jié)構(gòu)微小復(fù)雜，內(nèi)部任何的物理?yè)p傷對(duì)于它都是致命的。水在低于零度的條件下會(huì)結(jié)冰。如果將細(xì)胞懸浮在純水中，隨著溫度的降低，細(xì)胞內(nèi)外的水份都會(huì)結(jié)冰，所形成...

游離RNA(或稱(chēng)循環(huán)RNA,cell-freeRNA,簡(jiǎn)稱(chēng)cfRNA),即存在于細(xì)胞外的轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物,包括mRNA和RNA,在人的多種體液中被普遍研究并成為疾病無(wú)創(chuàng)性診斷和研究的新分子標(biāo)志物。文獻(xiàn)總結(jié)了以下兩個(gè)方面，一方面游離RNA主要來(lái)源于tumour細(xì)胞，另一...

細(xì)胞凍存是細(xì)胞保存的主要方法之一。利用凍存技術(shù)將細(xì)胞置于-196℃液氮中低溫保存，可以使細(xì)胞暫時(shí)脫離生長(zhǎng)狀態(tài)而將其細(xì)胞特性保存起來(lái)，這樣在需要的時(shí)候再?gòu)?fù)蘇細(xì)胞用于實(shí)驗(yàn)。而且適度地保存一定量的細(xì)胞，可以防止因正在培養(yǎng)的細(xì)胞被污染或其他意外事件而使細(xì)胞丟種，起到了...

外泌體（exosome）是所有細(xì)胞釋放出的細(xì)菌大小的顆粒。它們天然地存在于血液中。根據(jù)來(lái)自美國(guó)德州大學(xué)MD安德森一些疾病中心的一項(xiàng)新的研究，對(duì)外泌體進(jìn)行基因操縱可能提供一種新的胰腺病治病方法。論文通信作者為德州大學(xué)MD安德森一些疾病中心一些疾病生物學(xué)系研究員R...

除了讓細(xì)胞更好貼上去，鼠尾膠原蛋白還能用于制備三維膠，這樣可以在培養(yǎng)皿中一定程度上模擬身體內(nèi)部的生長(zhǎng)環(huán)境，讓細(xì)胞在更真實(shí)地條件下進(jìn)行生長(zhǎng)。當(dāng)然，除了這些，耗子尾汁還能做到很多事情，只需要打開(kāi)網(wǎng)站——知網(wǎng)，輸入鼠尾膠原蛋白就能看到，例如鼠尾膠原蛋白可用于制備防皺...

細(xì)胞凍存是細(xì)胞保存的主要方法之一。利用凍存技術(shù)將細(xì)胞置于-196℃液氮中低溫保存，可以使細(xì)胞暫時(shí)脫離生長(zhǎng)狀態(tài)而將其細(xì)胞特性保存起來(lái)，這樣在需要的時(shí)候再?gòu)?fù)蘇細(xì)胞用于實(shí)驗(yàn)。而且適度地保存一定量的細(xì)胞，可以防止因正在培養(yǎng)的細(xì)胞被污染或其他意外事件而使細(xì)胞丟種，起到了...

動(dòng)物細(xì)胞RNA提?。?、懸浮細(xì)胞：可直接離心后棄掉培養(yǎng)基，用無(wú)菌PBS清洗1~2遍后，再用適量PBS懸浮起來(lái)，然后再加入裂解液進(jìn)行裂解。千萬(wàn)不要完全棄掉液體后，往沉淀細(xì)胞里直接加入裂解液，這樣會(huì)使外表層的細(xì)胞裂解后釋放的組蛋白包裹粘附在沉淀細(xì)胞外側(cè)，從而限制沉...

外泌體相關(guān)蛋白質(zhì)與肺病的診斷：近年來(lái)眾多文獻(xiàn)報(bào)道，肺病細(xì)胞分泌的外泌體中富含多種蛋白質(zhì)并促進(jìn)肺病的發(fā)生的發(fā)展，是早期診斷肺病的有效途徑。有研究發(fā)現(xiàn)，NSCLC患者肺組織外泌體表面EGFR免疫染色呈陽(yáng)性的占80%，而慢性肺炎組織的外泌體EGFR呈陽(yáng)性的只占2%，...

拭子RNA提取試劑的選擇？操作簡(jiǎn)便性。操作簡(jiǎn)便性也是拭子RNA提取試劑選擇的一個(gè)重要因素。操作過(guò)于復(fù)雜，不光費(fèi)時(shí)費(fèi)力，還容易導(dǎo)致樣本間的交叉污染，也容易損失樣本。特別是用于臨床檢測(cè)或樣本量較多情況下的檢測(cè)，操作復(fù)雜如果導(dǎo)致交叉污染會(huì)引起誤診，還會(huì)影響出檢測(cè)報(bào)告...

DNA稱(chēng)脫氧核糖核酸，是一種分子，雙鏈結(jié)構(gòu)，由脫氧核糖核苷酸（成分為：脫氧核糖、磷酸及四種含氮堿基）組成?？山M成遺傳指令，引導(dǎo)生物發(fā)育與生命機(jī)能運(yùn)作。主要功能是長(zhǎng)期性的資訊儲(chǔ)存，可比喻為“藍(lán)圖”或“食譜”。RNA稱(chēng)核糖核酸，是以DNA的一條鏈為模板，以堿基互補(bǔ)...

為了能夠從小鼠身上提取足夠的DNA，要從它們身上取下足量的細(xì)胞用于實(shí)驗(yàn)。為了盡可能減少對(duì)動(dòng)物的傷害和方便試驗(yàn)人員的操作，剪下一小段鼠尾是一個(gè)不錯(cuò)的選擇。就讓我們來(lái)盤(pán)點(diǎn)一下「耗子尾汁」的三種用法↓↓↓鼠尾取血剪下幾毫米小鼠尾巴、在小鼠尾靜脈上劃一道小口、用注射器...

RNA提取試劑的選擇：首先，要確定材料的可用性。盡管現(xiàn)有的RNA提取試劑都用壓制RNase的成分，但提取的材料仍需謹(jǐn)慎處理。提取的材料的新鮮度是獲取完整RNA的關(guān)鍵，但是由于種種原因無(wú)法立即從新鮮材料中提取RNA時(shí)，使用Takara公司的樣品保護(hù)劑Sample...

鼠尾膠原在心肌細(xì)胞氧化損傷中的保護(hù)作用：膠原蛋白具有抗氧化作用，但既往在實(shí)驗(yàn)室主要將鼠尾膠原用于促進(jìn)細(xì)胞貼壁和支架構(gòu)建，對(duì)于其抗氧化作用目前尚無(wú)相關(guān)研究。目的：探討鼠尾膠原對(duì)過(guò)氧化氫導(dǎo)致離體心肌細(xì)胞氧化損傷的保護(hù)作用。方法：將原代培養(yǎng)的SD大鼠乳鼠心肌細(xì)胞隨機(jī)...

酵母總RNA快速提取試劑盒(離心柱型)：一、原理簡(jiǎn)介。改進(jìn)的異硫氰酸胍/酚一步法裂解細(xì)胞和滅活RNA酶，然后總RNA在高離序鹽狀態(tài)下選擇性吸附于離心柱內(nèi)硅基質(zhì)膜，再通過(guò)一系列快速的漂洗－離心的步驟,去蛋白液和漂洗液將細(xì)胞代謝物、蛋白等雜質(zhì)去除，較后低鹽的RNa...

植物RNA快速提取試劑盒：是一種單相RNA快速提取試劑盒，可高效裂解堅(jiān)固的植物細(xì)胞并強(qiáng)烈壓制RNA酶活性。細(xì)胞破碎之后，植物多糖立即被PlantRNAtrip獨(dú)特的成分結(jié)合。離心抽提步驟將RNA與滅活的RNA酶、蛋白、基因組DNA污染分離，并清理植物多糖多酚以...

無(wú)血清細(xì)胞凍存液的使用方法及注意事項(xiàng)：無(wú)血清細(xì)胞凍存液：含多種保護(hù)劑成分,一些保護(hù)劑,易于穿透細(xì)胞,避免細(xì)胞內(nèi)部水分子形成冰晶損傷細(xì)胞,同時(shí)另一些保護(hù)劑不能穿透細(xì)胞,但可以在冰晶形成之前,優(yōu)先結(jié)合細(xì)胞外的水分子,降低細(xì)胞外溶液的電解質(zhì)濃度,減少陽(yáng)離子進(jìn)入細(xì)胞的...

RNA的全稱(chēng)是什么？核酸是一個(gè)叫米歇爾的瑞士青年化學(xué)家發(fā)現(xiàn)的，那還是1869年的事，到了1909年，一位美國(guó)生化學(xué)家又發(fā)現(xiàn)核酸中的碳水化合物有兩種核糖分子，因此核酸也有兩種，一種叫脫氧核糖酸，英文縮寫(xiě)就是DNA，另一種是核糖核酸，英文縮寫(xiě)是RNA。DNA一般只...

與DNA不同，RNA一般為單鏈長(zhǎng)分子，不形成雙螺旋結(jié)構(gòu)，但是很多RNA也需要通過(guò)堿基配對(duì)原則形成一定的二級(jí)結(jié)構(gòu)乃至三級(jí)結(jié)構(gòu)來(lái)行使生物學(xué)功能。RNA的堿基配對(duì)規(guī)則基本和DNA相同，不過(guò)除了A-U、G-C配對(duì)外，G-U也可以配對(duì)。在細(xì)胞中，根據(jù)結(jié)構(gòu)功能的不同，RN...

酵母RNA的提取方法：濃鹽法。酵母菌外層是厚達(dá)1.2μm的細(xì)胞壁，其化學(xué)成分是葡聚糖（30-40%）和甘露聚糖（30%），此外，脂類(lèi)8.5-13.5%，蛋白質(zhì)6-8%，還含有幾丁質(zhì)，酵母菌的葡聚糖，分子是為240000道爾頓，是一種分枝聚合物，葡聚糖與甘露糖之...

環(huán)狀RNA是一類(lèi)產(chǎn)生于RNA剪切過(guò)程中的封閉喚醒RNA分子，主要由外顯子和（或）內(nèi)含子構(gòu)成。環(huán)狀RNA參與了復(fù)雜的RNA-RNA的相互作用網(wǎng)絡(luò)，在基因轉(zhuǎn)錄后調(diào)控中發(fā)揮作用；環(huán)狀RNA可直接與蛋白質(zhì)結(jié)合，也可通過(guò)RNA介導(dǎo)間接與蛋白質(zhì)發(fā)生關(guān)聯(lián)，影響蛋白質(zhì)功能；部...

密度過(guò)高會(huì)讓細(xì)胞沒(méi)有足夠的生存空間，密度過(guò)低會(huì)讓細(xì)胞無(wú)法互相連接健康生長(zhǎng)。建議大家在細(xì)胞接種前，一定要調(diào)整好適合細(xì)胞生長(zhǎng)的濃度，提高細(xì)胞的存活率。溫度控制不達(dá)標(biāo)慢凍快融是細(xì)胞凍存復(fù)蘇的關(guān)鍵詞之一。常規(guī)的凍存操作中，都會(huì)要求嚴(yán)格的梯度降溫，常見(jiàn)的是-4℃→-20...

鼠尾膠原蛋白Ⅰ型使用方法及注意事項(xiàng)：通過(guò)醋酸抽提、氯化鈉沉淀、磷酸氫二鈉沉淀等步驟制備的。鼠尾膠原蛋白可用于包被細(xì)胞培養(yǎng)器皿，培養(yǎng)一些在普通細(xì)胞培養(yǎng)器皿中不易貼壁的細(xì)胞。也可用于制備三維膠，模擬真實(shí)的生長(zhǎng)環(huán)境，使細(xì)胞在三維環(huán)境中生長(zhǎng)。1，在使用鼠膠原蛋白型包被...