動物實(shí)驗(yàn)外包,利用動物**模型,科研工作者可以從細(xì)胞和分子水平研究**的發(fā)生和發(fā)展過程,對于了解**的發(fā)病機(jī)制和轉(zhuǎn)移機(jī)制有重要作用,因此,**模型可以作為實(shí)驗(yàn)假說和臨床假說的實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ),能為惡性**的病因?qū)W、發(fā)展過程和機(jī)制提供特有的條件。**模型按照建立的方法及...
動物實(shí)驗(yàn)外包胃*模型介紹制備胃*動物模型的方法①甲基膽蒽(MC)誘發(fā)小鼠胃*。20g左右的小鼠,無菌手術(shù)下,在腺胃黏膜面穿掛含甲基膽蒽線結(jié)。含MC的線結(jié)是用普通細(xì)線,在一端打結(jié)后,將線結(jié)置于盛有MC小玻璃試管內(nèi),在酒精燈上微微加溫,使MC液化滲入線結(jié),MC濃度...
動物實(shí)驗(yàn)外包胃*模型介紹制備胃*動物模型的方法①甲基膽蒽(MC)誘發(fā)小鼠胃*。20g左右的小鼠,無菌手術(shù)下,在腺胃黏膜面穿掛含甲基膽蒽線結(jié)。含MC的線結(jié)是用普通細(xì)線,在一端打結(jié)后,將線結(jié)置于盛有MC小玻璃試管內(nèi),在酒精燈上微微加溫,使MC液化滲入線結(jié),MC濃度...
2008年新藥創(chuàng)制重大專項(xiàng)啟動以來,緊密圍繞構(gòu)建國家藥物創(chuàng)新技術(shù)體系目標(biāo),在我國新藥研發(fā)和公眾用藥安全等方面獲得重大進(jìn)展。藥品監(jiān)管科學(xué)是近十幾年發(fā)展形成的前沿學(xué)科,受到世界科學(xué)界和管理界的重視[9,27]。中藥監(jiān)管科學(xué)發(fā)展與現(xiàn)實(shí)存在問題,需要理論創(chuàng)新、藥物創(chuàng)新...
外泌分離后可以做蛋白,也可以做RNA(microRNA和LncRNA),36%的研究人員通過Westernblot或其他方法來鑒定蛋白,29%的人員利用qPCR對microRNA表達(dá)譜進(jìn)行分析,9%利用芯片進(jìn)行microRNA表達(dá)譜分析。同時(shí),新一代測序的用戶...
外泌體可以通過細(xì)胞外刺激、微生物攻擊和其他應(yīng)激條件的誘導(dǎo)等而生成。目前普遍的觀點(diǎn)認(rèn)為,異于普通微泡直接由細(xì)胞出芽脫落生成,外泌體的形成始于細(xì)胞內(nèi)陷形成早期內(nèi)體,隨后在內(nèi)體轉(zhuǎn)運(yùn)復(fù)合體及一些相關(guān)蛋白的調(diào)控下,早期內(nèi)體內(nèi)出芽形成多個(gè)腔內(nèi)小囊泡構(gòu)成的MVB,后者比較后...
外泌體中常見的細(xì)胞質(zhì)蛋白是Rabs蛋白,是鳥苷酸三磷酸酶(GTPases,)家族的一種。它可以調(diào)節(jié)外泌體膜與受體細(xì)胞的融合,有文獻(xiàn)報(bào)道稱RAB4, RAB5和 RAB11主要出現(xiàn)于早期以及回收的核內(nèi)體中,RAB7 和 RAB9主要出現(xiàn)于晚期的核內(nèi)體。現(xiàn)有大量的...
外泌體鑒定,可以用和表面抗原對應(yīng)的抗體進(jìn)行免疫印跡(WB)、透射電子顯微鏡(TEM)、納米粒徑分析(如NanoSight LM10)等來驗(yàn)證。前面也說了,ISEV建議用表面蛋白來界定所提取的細(xì)胞外囊泡,所以用CD63來做WB或ELISA是必不可少的了。使用Wa...
外泌體在1980年初次被發(fā)現(xiàn)后,其被認(rèn)為是細(xì)胞排泄廢物的一種方式,如今隨著大量對其生物來源、其物質(zhì)構(gòu)成及運(yùn)輸、細(xì)胞間信號的傳導(dǎo)以及在體液中的分布的研究發(fā)現(xiàn)外泌體具有多種多樣的功能。外泌體的功能取決于其所來源的細(xì)胞類型,其可參與到機(jī)體免疫應(yīng)答、抗原提呈、細(xì)胞遷移...
外泌體在**、神經(jīng)退行性疾病、肝臟和腎臟疾病以及多種心肺疾病的預(yù)后和診斷中發(fā)揮著重要作用,比較近的研究表明,外泌體也是一種新型的***試劑。來自間充質(zhì)干細(xì)胞的外泌體已在各種疾病模型中進(jìn)行了測試,如呼吸系統(tǒng)、心血管、神經(jīng)系統(tǒng)、肌肉骨骼、肝臟、胃腸道、皮膚和腎臟疾...
外泌體表面有其特異性標(biāo)記物(如CD63、CD9蛋白),用包被抗標(biāo)記物抗體的磁珠與外泌體囊泡孵育后結(jié)合,即可將外泌體吸附并分離出來。磁珠法具有特異性高、操作簡便、不影響外泌體形態(tài)完整等優(yōu)點(diǎn),但是效率低,外泌體生物活性易受pH和鹽濃度影響,不利于下游實(shí)驗(yàn),難以**...
外泌體Exosome是由活細(xì)胞分泌的,它是一種亞細(xì)胞成分,組要成分是磷脂雙分子和攜帶的膜性分子,其界定依據(jù)形態(tài)學(xué)和生物化學(xué)及提取方式不同細(xì)胞源的exosome是不同的,這些不同的理化性質(zhì)有利于exosome的提取。從體外培養(yǎng)的細(xì)胞中分離和提取exosome的主...
外泌體研究界比較家喻戶曉的就是大牛Thery C了,想當(dāng)年一篇外泌體超速離心提取方法的文章已經(jīng)是成為了眾多外泌體研究者的“圣經(jīng)”了(Isolation and Characterization of Exosomes from Cell Culture Sup...
外泌體是胞內(nèi)多泡體與細(xì)胞膜融合后,釋放到細(xì)胞外的膜性小囊泡,是細(xì)胞間信號傳輸?shù)妮d體。2013年,諾貝爾生理學(xué)或醫(yī)學(xué)獎授予了三位科學(xué)家,表彰其在細(xì)胞間囊泡運(yùn)輸調(diào)控機(jī)制領(lǐng)域作出突出貢獻(xiàn),將外泌體研究的熱度推向高潮。由于在臨床上的巨大應(yīng)用價(jià)值,近幾年外泌體成為科研熱...
外泌體鑒定透射電鏡觀察能夠確認(rèn)外泌體的形態(tài)學(xué)特征,但無法體現(xiàn)樣本中所有外泌體顆粒的粒徑分布情況及整體濃度;流式細(xì)胞儀可測定的粒徑大小為150nm以上,并不適合檢測游離的外泌體顆粒。英瀚斯生物采用基于馬爾文Nanosight平臺的納米顆粒追蹤分析 (Nanopa...
外泌體攜帶大量特異性的蛋白質(zhì)(如細(xì)胞因子、生長因子)以及功能性的mRNAs、miRNAs等生物活性物質(zhì),在體內(nèi)參與細(xì)胞通訊、細(xì)胞遷移、促血管新生和抗腫瘤免疫等生理過程,與多種疾病的發(fā)生和進(jìn)程密切相關(guān)。由于外泌體的特殊結(jié)構(gòu)和功能,使得它具有潛在的應(yīng)用價(jià)值,一方面...
外泌體是一類由細(xì)胞分泌的病毒大小的膜狀囊泡,它們攜帶有蛋白質(zhì)與核酸,調(diào)節(jié)著胞內(nèi)的溝通。目前較常用的外泌體提取方法是differential centrifugation (DC)——差速離心法。也有用試劑盒提取外泌體,但效率均不高。聚乙二醇(PEG)用于濃縮...
外泌體的提取方法有多種:包括傳統(tǒng)的差速離心、密度梯度離心,以及后來發(fā)展的超濾法、聚合物沉淀法、免疫分離、隔離篩選法、體積排阻色譜法等。這些方法各有利弊。外泌體經(jīng)細(xì)胞分泌后存在于體液或者血液中,故檢測外泌體的樣本一般為血液(全血、血漿)、體液(尿液、唾液、腦脊液...
外泌體提取試劑盒,市場上已出現(xiàn)各種商業(yè)化的外泌體提取試劑盒,有的是通過特殊設(shè)計(jì)的過濾器過濾掉雜質(zhì)成分,有的則采用空間排阻色譜法(SEC)進(jìn)行分離純化,也有的則利用化合物沉淀將法外泌體沉淀出來。這些試劑盒不需要特殊設(shè)備,隨著產(chǎn)品不斷更新?lián)Q代,提取效率和純化效果逐...
外泌體是細(xì)胞間進(jìn)行物質(zhì)運(yùn)輸和信息交流的重要工具,可以通過調(diào)節(jié)免疫功能促進(jìn)**的增殖,血管新生和**轉(zhuǎn)移。與病毒***,幫助病毒逃避免疫關(guān)系很大,并與心血管疾病,老年癡呆等疾病具有密切關(guān)系。由于外泌體直徑小,樣本含量低,提取十分困難。已有的外泌體分離方式有密度梯...
外泌體是一個(gè)高度異質(zhì)性的群體,具有獨(dú)特的誘導(dǎo)復(fù)雜生物學(xué)反應(yīng)的能力。外泌體的異質(zhì)性可以根據(jù)其大小、含量(載物)、對受體細(xì)胞的功能影響以及細(xì)胞來源來概念化。這些特征的不同組合導(dǎo)致了外泌體的復(fù)雜異質(zhì)性。外泌體可能作為細(xì)胞之間物質(zhì)和信號通訊的途徑,不同的細(xì)胞通過分泌攜...
疫苗新藥臨床前研究中藥物安全性評價(jià)的難點(diǎn)在于疫苗本身并不直接發(fā)揮預(yù)防或***作用,而是通過誘導(dǎo)免疫系統(tǒng)產(chǎn)生抗體或活化T細(xì)胞發(fā)揮作用。在疫苗研發(fā)中需要考慮疫苗可能會產(chǎn)生的安全問題。(1)疫苗成分本身作為毒性物質(zhì)對機(jī)體的直接損傷。(2)疫苗誘導(dǎo)免疫系統(tǒng)引起的與免疫...
監(jiān)管科學(xué)研究旨在開發(fā)新的工具、標(biāo)準(zhǔn)和方法進(jìn)行受監(jiān)管藥物安全性評價(jià)。該學(xué)科是監(jiān)管決策的基礎(chǔ),是用于人用藥和獸藥整個(gè)生命周期中評估其質(zhì)量、安全性和有效性的科學(xué)。在醫(yī)藥產(chǎn)品開發(fā)和評價(jià)中,所用的科學(xué)技術(shù)必須進(jìn)行改進(jìn),在毒理學(xué)的現(xiàn)代化、推動臨床評價(jià)和個(gè)體化醫(yī)療的創(chuàng)新、創(chuàng)...
外泌體的分離對于理解它們的作用機(jī)制和它們在生物醫(yī)學(xué)科學(xué)中的應(yīng)用是至關(guān)重要的。一些實(shí)驗(yàn)室已經(jīng)成功地利用諸如超離心法、超濾法、層析法、基于聚合物的沉淀法和抗體偶聯(lián)磁珠的親和捕獲等技術(shù)分離外泌體。已有研究表明,密度梯度離心法可以分離出比較純凈的外泌體。1983年外泌...
2008年新藥創(chuàng)制重大專項(xiàng)啟動以來,緊密圍繞構(gòu)建國家藥物創(chuàng)新技術(shù)體系目標(biāo),在我國新藥研發(fā)和公眾用藥安全等方面獲得重大進(jìn)展。藥品監(jiān)管科學(xué)是近十幾年發(fā)展形成的前沿學(xué)科,受到世界科學(xué)界和管理界的重視[9,27]。中藥監(jiān)管科學(xué)發(fā)展與現(xiàn)實(shí)存在問題,需要理論創(chuàng)新、藥物創(chuàng)新...
免疫熒光染色:由于細(xì)胞內(nèi)的抗原活性得到較好的保留,冰凍切片常用于免疫熒光染色實(shí)驗(yàn),以檢測特定的蛋白質(zhì)或其他生物分子??偨Y(jié)組織病理染色切片技術(shù)包括石蠟包埋及切片和冰凍包埋及切片兩種方法。石蠟切片適用于常規(guī)的病理診斷和科學(xué)研究,通過復(fù)雜的處理步驟,能夠提供高質(zhì)量的...
在獲得藥物安全性評價(jià)資料之后,藥物研究將進(jìn)入臨床試驗(yàn)階段。相對于在動物體內(nèi)進(jìn)行的臨床前研究,臨床試驗(yàn)是指試驗(yàn)對象是人體的硏究。根據(jù)研究目的和受試者的不同,人體臨床研究一般分為4期(-ⅣV期),I-Ⅲ期臨床研究的結(jié)果,連同臨床前期的數(shù)據(jù)提交給藥監(jiān)評審機(jī)構(gòu),以獲得...
藥物安全性評價(jià),藥學(xué)研究的風(fēng)險(xiǎn)控制與階段性要求創(chuàng)新藥的藥學(xué)研究主要是為了滿足不同階段臨床試驗(yàn)需要,IND階段藥學(xué)研究應(yīng)首先能進(jìn)行藥物安全性評價(jià)。目前,一般認(rèn)為,對于創(chuàng)新藥可能引起臨床安全性的主要風(fēng)險(xiǎn)包括:產(chǎn)品未知或不純組分、化學(xué)結(jié)構(gòu)含有或潛在毒性成分、穩(wěn)定性差...
初步的臨床藥理學(xué)及藥物安全性評價(jià)試驗(yàn),為新藥人體試驗(yàn)的起始期,又稱為早期人體試驗(yàn)。I期臨床試驗(yàn)包括耐受性試驗(yàn)和藥代動力學(xué)研究,一般在健康受試者中進(jìn)行。其目的是研究人體對藥物的耐受程度,并通過藥物代謝動力學(xué)研究,了解藥物在人體內(nèi)的吸收、分布、消除的規(guī)律,為制定給...
病理染色可用于研究疾病機(jī)制?病理過程:病理染色可以幫助研究人員了解疾病的發(fā)病機(jī)制和發(fā)展過程。例如,通過連續(xù)的切片染色,可以觀察到疾病的進(jìn)展和變化。?分子標(biāo)記:免疫組化染色等特殊染色方法可以用于檢測特定的蛋白質(zhì)或其他生物分子,揭示其在疾病過程中的作用。4. 評估...